{"id":19,"date":"2024-04-03T23:11:00","date_gmt":"2024-04-03T20:11:00","guid":{"rendered":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/32-terapeutiliste-antikehade-disain-ja-tootmine\/"},"modified":"2024-04-10T10:15:55","modified_gmt":"2024-04-10T07:15:55","slug":"32-terapeutiliste-antikehade-disain-ja-tootmine","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/32-terapeutiliste-antikehade-disain-ja-tootmine\/","title":{"rendered":"3.2. Terapeutiliste antikehade disain ja tootmine"},"content":{"rendered":"<h2>Antikeha efektorfunktsioonide disain<\/h2>\n<p>Terapeutiliste antikehade arendamisel on lisaks antigeeniga seondumise omaduste (spetsiifilisus, afiinsus) disainile oluline ka antikeha Fc-regiooni modifitseerimine antikeha ravitoime ja ohutuse parandamiseks.<\/p>\n<p>Fc-regiooni modifikatsioonide eesm\u00e4rgiks on:<\/p>\n<ul>\n<li>antikeha efektorfunktsioonide (ADCC, CDC, fagots\u00fctoos) suurendamine v\u00f5i v\u00e4hendamine;<\/li>\n<li>antikeha stabiilsuse ja poolv\u00e4\u00e4rtusaja suurendamine;<\/li>\n<\/ul>\n<p>Antikeha efektorfunktsioonide m\u00f5jutamiseks modifitseeritakse Fc-retseptoritega seonduvaid alasid vastavalt soovitud toimele. Peamisteks modifikatsioonideks on muutused Fc-regiooni gl\u00fckos\u00fc\u00fclimises ning aminohapete asendusmutatsioonid. Enamuse kasvajavastaste antikehade puhul soovitakse t\u00f5hustada immuunmehhanisme kasvajarakkude h\u00e4vitamiseks. N\u00e4iteks fukoosij\u00e4\u00e4kide eemaldamine Fc-regiooni gl\u00fckaanide koosseisust t\u00f5stab antikehast s\u00f5ltuvat ts\u00fctotoksilisust (ADCC), mitmed aminohapete asendused suurendavad Fc-regiooni seondumist Fc\u03b3RIIIA retseptoriga, mis on oluline ADDC aktivatsioonis.<\/p>\n<p>Antikeha Fc-regiooni vahendatud efektorfunktsioonide v\u00e4hendamine v\u00f5ib-olla oluline \u00fclem\u00e4\u00e4rase immuunrakkude aktivatsiooni ja kahjulike k\u00f5rvaltoimete v\u00e4ltimiseks. Lisaks antikeha fragmentidele (Fab), kus Fc-regioon puudub, on v\u00f5imaluseks IgG<sub>2<\/sub> v\u00f5i IgG<sub>4<\/sub> alaklassi antikehade kasutamine, mis seonduvad n\u00f5rgalt Fc retseptorite ja komplemendiga. Gl\u00fckaanide eemaldamisega v\u00f5i teatud aminohapete asendusmutatsioonidega\u00a0 saab v\u00e4hendada IgG<sub>1<\/sub> isot\u00fc\u00fcpi antikehade efektorfunktsioone.<\/p>\n<p>IgG antikehade seondumine FcRn retseptoriga veresoonte endoteelirakkudel v\u00f5imaldab nende pikaaegset p\u00fcsimist organismis. On leitud aminohapete asendusi FcRn seonduvas alas, mis suurendavad IgG poolv\u00e4\u00e4rtusaega veelgi ja t\u00f5stavad terapeutiliste antikehade efektiivsust. Optimeeritud efektorfunktsioonidega antikehi nimetatakse ka <strong>bioparemateks<\/strong> (<em>biobetters, biosuperiors<\/em>) terapeutilisteks antikehadeks.<\/p>\n<h2>Antikehade tootmisest<\/h2>\n<p>Terapeutiliste antikehade tootmisprotsess on mitmeetapiline, koosnedes rekombinantsete antikehade ekspressioonist suuremahulistes bioreaktorites ja sellele j\u00e4rgnevast antikehade puhastamisest. Antikehi toodetakse peamiselt eukar\u00fcootsetes rakuliinides, v\u00f5imaldades antikehale omaseid translatsioonij\u00e4rgseid modifikatsioone (gl\u00fckos\u00fc\u00fclimine). Antikeha fragmente on v\u00f5imalik toota ka bakterkultuuris.<\/p>\n<p>K\u00f5ige levinumaks rakuliiniks terapeutiliste antikehade tootmisel on hiina hamstri munasarjarakud (CHO \u2013 <em>Chinese Hamster Ovary<\/em>), mida saab kasvatada ka suspensioonikultuuris. V\u00e4hemal m\u00e4\u00e4ral on antikehade ekspressiooniks kasutatud hiire l\u00fcmfoidseid rakuliine. \u00a0Antikehade ekspressioonikultuure kasvatatakse suuremahulistes bioreaktorites (5000 \u201325\u00a0000 liitrit), v\u00f5imaldades toota isegi \u00fcle 100 kg monokloonset antikeha \u00fche ts\u00fckli jooksul. Antikehad puhastatakse esmalt valk A afiinsuskromatograafia abil, millele j\u00e4rgneb 1\u20132 t\u00e4iendavat kromatograafia etappi ning filtreerimised. Puhastatud antikehi s\u00e4ilitatakse l\u00fcofiliseerituna v\u00f5i lahuses.<\/p>\n<div id=\"accordion\" class=\"accordion\">\n<p class=\"p1\"><\/p><div class=\"accordion mb-3\">\n        <div class=\"accordion-item accordion-item--white\">\n        <h2 class=\"accordion-header\" id=\"accordion-69e1aebfe3aa4-heading\">\n            <button class=\"accordion-button collapsed\" type=\"button\" data-bs-toggle=\"collapse\" data-bs-target=\"#accordion-69e1aebfe3aa4-collapse\" aria-expanded=\"true\" aria-controls=\"accordion-69e1aebfe3aa4-collapse\">Milllised on peamised antikeha Fc-regiooni modifikatsioonid terapeutiliste antikehade parendamisel? <\/button>\n        <\/h2>\n        <div id=\"accordion-69e1aebfe3aa4-collapse\" class=\"accordion-collapse collapse\" aria-labelledby=\"accordion-69e1aebfe3aa4-heading\">\n            <div class=\"accordion-body\">Gl\u00fckaanide modifikatsioonid ja aminohapete asendusmutatsioonid.<\/div>\n        <\/div>\n        <\/div>\n    <\/div>\n<\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Antikeha efektorfunktsioonide disain Terapeutiliste antikehade arendamisel on lisaks antigeeniga seondumise omaduste (spetsiifilisus, afiinsus) disainile oluline ka antikeha Fc-regiooni modifitseerimine antikeha ravitoime ja ohutuse parandamiseks. Fc-regiooni modifikatsioonide eesm\u00e4rgiks on: antikeha efektorfunktsioonide (ADCC, CDC, fagots\u00fctoos) suurendamine v\u00f5i v\u00e4hendamine; antikeha stabiilsuse ja poolv\u00e4\u00e4rtusaja &#8230;<\/p>\n","protected":false},"author":280,"featured_media":0,"parent":0,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"_acf_changed":false,"inline_featured_image":false,"footnotes":""},"class_list":["post-19","page","type-page","status-publish","hentry"],"acf":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/19","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/wp-json\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/wp-json\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/wp-json\/wp\/v2\/users\/280"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=19"}],"version-history":[{"count":2,"href":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/19\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":110,"href":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/19\/revisions\/110"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/sisu.ut.ee\/antikehad\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=19"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}